Cd 138 маркеры воспаления

Метод определения

Гистологическое исследование эндометрия с окрашиванием гематоксилином-эозином. Иммуногистохимическое исследование экспрессии CD138 (пероксидазный и авидин-биотиновый методы).

Исследуемый материал
Соскобы, аспираты, биоптаты эндометрия, фиксированные в парафиновом блоке

Комплексное исследование эндометрия (биоптатов, аспиратов, соскобов), включающее морфологическое описание и иммуногистохимическую оценку экспрессии CD138 для дифференциальной диагностики хронического эндометрита.

Хронический эндометрит (в соответствии с современным определением этого патологического состояния) – клинико-морфологический синдром, характеризующийся комплексом морфофункциональных изменений эндометрия воспалительного генеза, которые приводят к нарушению нормальной циклической трансформации и рецептивности ткани.

В структуре гинекологической патологии у женщин репродуктивного возраста частота хронического эндометрита составляет от 3% до 73%. Расхождения в статистической оценке встречаемости этой патологии прежде всего связаны с трудностями морфологической верификации диагноза. Проблема диагностики хронического эндометрита имеет социальное значение, поскольку данное заболевание часто приводит к нарушению репродуктивной функции, являясь причиной бесплодия, неудачных попыток экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), невынашивания беременности, осложненного течения беременности и родов.

Факторами риска развития хронического эндометрита могут являться инфекционно-воспалительные осложнения после беременностей и родов, использование внутриматочных спиралей, инфекции влагалища и шейки матки, бактериальный вагиноз, деформации полости матки с нарушением циклического отторжения эндометрия, а также инвазивные вмешательства в полость матки, лучевая терапия в области органов малого таза и пр. Хронический эндометрит может длительное время протекать, не вызывая никаких симптомов. В некоторых случаях симптомы выражены настолько слабо, что могут оставаться незамеченными.

Наиболее важную роль в развитии нарушений репродуктивной функции при хроническом эндометрите имеют иммунологические изменения, характеризующиеся повышением числа плазматических клеток в эндометрии, выраженным клеточным и медиаторным дисбалансом на фоне хронического воспаления, подавлением фагоцитарной активности лейкоцитов. Доказано, что при хроническом эндометрите нарушается рецептивность эндометрия за счет снижения экспрессии рецепторов эстрадиола и нарушения индекса соотношения рецепторов прогестерона и эстрадиола. С этими нарушениями связаны как недостаточный рост эндометрия, так и различные формы гиперплазии эндометрия.

Современный алгоритм обследования пациенток с клиническим диагнозом «хронический эндометрит» включает:

комплексное микробиологическое исследование (бактериоскопия, рН-метрия вагинального отделяемого, бактериологический посев из цервикального канала на флору и чувствительность к антибиотикам);
ультразвуковое исследование органов малого таза с допплерометрией сосудов матки на 5-9 и 22-24 день менструального цикла;
определение уровня АМГФ (альфа-2-микроглобулин фертильности) в менструальной крови на 2-3 день менструального цикла;
аспирационную биопсию с гистологическим исследованием эндометрия, осуществляемую на 7-10 день менструального цикла.

«Золотым стандартом» гистологической диагностики хронического эндометрита является морфологическое исследование эндометрия с определением экспрессии CD138 (кластер дифференциации 138: мембранный белок, который используют в качестве иммунологического маркера плазматических клеток). Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки следует производить на 7-10 день менструального цикла. Общепринятыми критериями морфологической диагностики хронического эндометрита являются:

Наличие лимфоидных инфильтратов, состоящих преимущественно из лимфоидных элементов, расположенных вокруг желез и кровеносных сосудов, в ряде случаев формирующих «лимфоидные фолликулы». Инфильтраты определяются во всех отделах функционального слоя эндометрия.
ИГХ-верификация наличия плазматических клеток.
Фиброз стромы, возникающий при длительном течении хронического воспаления, иногда захватывающий обширные участки.
Склероз стенок спиральных артерий эндометрия.

Литература

Краснопольский В. И., Серова О. Ф., Туманова В. А. и др. Влияние инфекций на репродуктивную систему женщин. Российский вестник акушера-гинеколога. 2004;5:26-29.
Кузнецова А. В. Хронический эндометрит. Арх. патол. 2000;3(62):48-52.
Стругацкий В. М., Силантьева Е. С. Акуш. и гин. 2002;6:51-53.
Сухих Г. Т., Шуршалина А. В. Хронический эндометрит: Руководство. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010:64.
Buckley C. H., Fox H. Biopsy pathology of the endometrium. Arnold. 2002:264.
Eckert L. O., Hawes S. E. Endometritis: The clinical-pathologic syndrome. Am. J. Obstet. Gynecol. 2002;186(4):690-695.
Eisert W. G. Dipiridamole. Platelets. Ed. by Michelson A. D. Cambridge (USA). 2002:215.
Glasser S. R., Aplin J. D. The endometrium. Taylor and Francis. 2002.
Haggerty C. L., Ness R. B., Amortegui A. et al. Endometritis does not predict reproductive morbidity after pelvic inflammatory disease. Am. J. Obstet. Gynecol. 2003;188:141-148.
Mount S., Mead P., Cooper K. Chlamydia trachomatis in the endometrium: can surgical pathologists identify plasma cell. Adv. Anat. Pathol. 2001;8(6):327-329.

Читайте также: Воспаление в районе паха

Источник

Иммуногистохимическое исследование хронического эндометрита с типированием плазматических клеток (CD-138) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для проведения дифференциальной диагностики хронического эндометрита.

ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.

Иммуногистохимическое исследование
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.

Хронический эндометрит

Хронический эндометрит — это клинико-морфологический синдром, при котором возникают функциональные и структурные изменения слизистой полости матки вследствие повреждения клеток эндометрия инфекционным агентом. Хронический эндометрит может протекать без отсутствия клинических признаков. Он часто является причиной нарушения репродуктивной функции, вплоть до бесплодия.

По этиологическому фактору хронический эндометрит бывает специфическим (с выявлением инфекции) или неспецифическим (полимикробной ассоциации).

Факторы риска развития хронического эндометрита:

Инфекционно-воспалительный процесс в малом тазу.
Наличие внутриматочной спирали.
Инфекции влагалища и шейки матки.
Бактериальный вагиноз.
Деформации полости матки с нарушением циклического отторжения эндометрия.
Инвазивные вмешательства в полость матки.
Лучевая терапия в области органов малого таза.
Раннее начало половой жизни.
Курение.
Употребление алкоголя.

В результате воздействия патологического фактора развивается воспалительная реакция, которая является универсальным способом защиты в организм. Про хроническом эндометрите возникает воспаление в интерстициальной ткани. Оно проявляется инфильтраций макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками и фиброзом ткани. На местном уровне наблюдается активация цитокинов-медиаторов воспаления. Цитокины способствуют дополнительному привлечению в зону воспаления лимфоцитов, активации нейтрофилов и макрофагов. В результате воспаления наблюдается повреждение эпителия, нарушение его пролиферации и нормальной циклической трансформации.

«Золотой стандарт» в диагностике хронического эндометрита это гистологическое исследование.
Диагноз выставляется врачом-патоморфологом на основании изучения биоптатов эндометрия. Морфологически заболевание проявляется инфильтрацией стромы эндометрия плазматическими клетками.

В настоящее время воспалительные заболевания органов малого таза относят к аутоиммунному процессу, который протекает как самоподдерживающаяся патологическая реакция.

Иммуногистохимическое исследование определяет характер иммунологических нарушений. Анализ выявляет пациенток с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.

CD-138
Это маркёр плазматических клеток. Его определение показано при неполной морфологической картине хронического эндометрита.

Показания к проведению ИГХ-исследования:

бесплодие;
хронический эндометрит;
воспалительные процессы слизистой полости матки.

Подготовка
Подготовка определяется лечащим врачом.

Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки рекомендовано проводить в среднюю и позднюю фазу пролиферации — на 7–10-й день менструального цикла.

Материалом для исследования являются парафиновый блок и предметные стёкла. В случае если материалом является образец ткани в растворе формалина, дополнительно должна быть выполнена услуга изготовления стёкол.

При проведении гистологического исследования в сторонней лаборатории необходимо предоставить протокол гистологического исследования.

Интерпретация результатов
Ответ выдаётся в виде описания микропрепарата, применяемых красителей и заключения. Заключение может интерпретировать только врач, направивший на проведение исследования.

Источник

Хронический эндометрит рассматривают как аутоиммунный процесс, для которого характерна инфильтрация эндометрия NK-клетками, B-лимфоцитами и активированными лимфоцитами (HLA-DR), а также нарушение экспрессии рецепторов стромальных и эпителиальных клеток к половым стероидам в эндометрии. При контакте с антигенами происходит активация лимфоцитов, которые формируют воспалительный процесс в ткани эндометрия, а затем аутоантигены продолжают поддерживать активацию лимфоцитов. Определение ряда иммунокомпетентных клеток позволяет достоверно выявить наличие хронического воспаления в эндометрии, оценить степень его выраженности, а также выявить аутоиммунный характер воспаления.

Синонимы русские

Морфологическое и иммуноцитохимическое исследование эндометрия.

Синонимы английские

Morphological examination of the endometrium and IСC (immunocytoochemistry), immunocytochemical analysis of endometrial biopsies.

Метод исследования

Иммуноцитохимический + жидкостная цитология.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Аспират из полости матки.

Общая информация об исследовании

Стандартное морфологическое исследование эндометрия включает в себя определение клеточного состава, соотношения клеток, фазы менструального цикла, патологических изменений – признаков атипии, инфильтрации воспалительными клетками при световой микроскопии. Материалом для исследования является эндометрий, полученный методом аспирационной биопсии эндометрия или при гистероскопии с биопсией эндометрия, после выскабливания (кюретаж полости матки).

Иммуноцитотохимия – это метод исследования клеток, основанный на обнаружении специфических антигенов с помощью присоединения к ним антител, меченных флюорохромом или ферментом. Антигены – молекулы белков или углеводов, имеющие уникальную трёхмерную структуру, способные индуцировать образование антител. Антитела – иммуноглобулины, распознающие антигены и присоединяющиеся к ним во время реакции “антиген-антитело”. Антигены и антитела – это молекулы, неразличимые при исследовании методом световой и электронной микроскопии. Для обнаружения специфических антигенов к образцу клеток добавляют реагент, содержащий меченные флюорохромом или ферментом антитела, в результате чего образуется иммунный комплекс “антиген-антитело”. Комплексы формируют специфическое окрашивание клеток и их внутренних структур, обеспечивая детекцию патологических изменений на молекулярном уровне. Иммуноцитохимическое исследование позволяет верифицировать онкологические заболевания, метастатические поражения, определить их гистологическую принадлежность, оценить экспрессию маркеров, влияющих на прогноз заболевания и подбор схемы эффективной химиотерапии.

Эндометрий – слизистая оболочка, выстилающая полость матки изнутри, необходимая для имплантации оплодотворенной яйцеклетки и развития плаценты во время беременности. Он подвергается динамическим структурным и функциональным изменениям во время менструального цикла под действием женских половых гормонов. Ряд патологических состояний нарушает нормальное циклическое функционирование эндометрия у женщин репродуктивного возраста. Наиболее распространенными причинами считаются хронический эндометрит, полипы эндометрия, ановуляция и миома матки.

Хронический эндометрит – это воспалительное заболевание эндометрия, чаще поражающее женщин репродуктивного возраста, но встречающееся и в постменопаузе. Наиболее распространенный симптом – маточные кровотечения, не связанные с менструацией. Кроме того, хронический эндометрит может быть причиной бесплодия и самопроизвольного прерывания беременности. Факторами риска являются воспалительные заболевания органов малого таза, внутриматочные контрацептивы (спирали), хирургические манипуляции в полости матки (выскабливание), недавняя беременность, инфекционно-воспалительные осложнения послеродового периода, попытки экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбрионов. Возбудителями заболевания чаще всего являются Escherichia coli, Enterococcus faecalis, различные виды стрептококков, Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и вирусы (ВПЧ, вирусы герпеса, энтеровирус).

Инфекционные агенты запускают защитную воспалительную реакцию, происходит инфильтрация эндометрия макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками, пролиферация фибробластов. Активированные макрофаги выделяют медиаторные цитокины, вызывающие активацию T- и B-лимфоцитов. Даже после полной элиминации инфекционного возбудителя воспаление может поддерживаться за счет аутоиммунных процессов – за счет первоначальной поликлональной активации лимфоцитов с последующей выработкой аутоиммунных антител. Воспаление вызывает изменения нормальной циклической дифференцировки и функционирования эндометрия, приводящие к нарушениям менструального цикла или снижению способности к имплантации оплодотворенной яйцеклетки.

Золотым стандартом диагностики хронического эндометрита считется гистологическое или цитологическое исследование биоптата эндометрия. Главным маркером является инфильтрация стромы эндометрия плазматическими клетками. Также часто обнаруживаются и другие воспалительные элементы: нейтрофилы (обычно в поверхностном эпителии и железах), субэпителиальные лимфоцитарные инфильтраты, гистиоциты с гемосидерином и редкие эозинофилы.

Поскольку эпизодические плазматические клетки обнаруживаются и в поздней секреторной фазе, и в строме полипов эндометрия, их присутствие не всегда означает инфекционную этиологию. В очень редких случаях обнаружение плазматических клеток в биоптате эндометрия может свидетельствовать о лимфопролиферативном заболевании.

Для дифференциальной диагностики используется метод иммуноцитохимии, позволяющий определить маркеры хронического эндометрита на молекулярном уровне и идентифицировать воспалительные клетки: плазматические клетки CD138, натуральные киллеры CD56 и CD16, B-клетки CD20 и активированные лимфоциты HLA-DR.

Увеличение количества натуральных киллеров CD56 и В-лимфоцитов (CD20) подтверждает активный хронический эндометрит. При активации аутоиммунного процесса при хроническом эндометрите определяется инфильтрация активированными лимфоцитами (HLA-DR).

При верификации диагноза назначается специфическая антибактериальная терапия. По результатам исследования можно оценить эффективность проводимой терапии, определить показания к ее коррекции.

Для чего используется исследование?

Для определения характера иммунологических нарушений, выявления пациентов с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.

Когда назначается исследование?

При необходимости подтверждения или исключения хронического эндометрита;
при утолщении эндометрия по результатам УЗИ;
при нарушении репродуктивной функции (бесплодие, привычное невынашивание беременности, преждевременные роды);
при нарушении менструального цикла (перименструальные кровянистые выделения, обильные менструации, ациклические маточные кровотечения); дисфункции яичников;
при верификации диагноза при гиперплазии эндометрия, миоме матки, эндометриозе, хронических воспалительных заболеваниях;
в качестве дополнительного исследования при оценке потенциальной эффективности гормональной терапии.

Что означают результаты?

Заключение выдается в виде описательного ответа с подсчетом количества клеток, экспрессирующих маркеры CD20+, CD56+, CD138+ и HLA-DR.

У женщин с хроническим активным эндометритом значительно повышено количество субпопуляции NK-клеток (CD56+) и субпопуляции В-лимфоцитов (CD20+), инфильтрирующих эндометрий, по сравнению пациентками контрольной группы.

Для аутоиммунного эндометрита характерна инфильтрация эндометрия цитотоксическими B-лимфоцитами (CD20+), плазматическими клетками (CD138+) и активированными лимфоцитами (HLA-DR) с последующим формированием аутоатител.

CD138+ клетки (синдекан 1) – протеогликаны, входящие в состав клеточных мембран плазматических клеток, в принципе, нехарактерны для здорового эпителия эндометрия. Интенсивность проявления клинических симптомов заболевания связана с повышенной концентрацией плазматических клеток (CD138+ ) в эндометрии.

Также рекомендуется

[12-125] Ki-маркер пролиферативной активности

[12-135] Исследование рецептивности эндометрия: рецепторы к эстрогенам, рецепторы к прогестеронам (в строме и железах эндометрия), Ki-67 (индекс пролиферативной активности), (кроме PTEN)

[12-071] Гистологическое исследование биопсийного материала

Литература

1) Techniques of immunohistochemistry: principles, pitfalls, and standardization. Richard W. Cartun, Clive R. Taylor and David J. Dabbs. Diagnostic Immunohistochemistry, Chapter 1, 1-46.

2) Benign Endometrium. David W Kindelberger and Marisa R Nucci. Gynecologic Pathology: A Volume in the Series: Foundations in Diagnostic Pathology, Chapter 6, 197-232.

3) The Female Genital Tract. Lora Hedrick Ellenson and Edyta C. Pirog Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease, Chapter 22, 991-1042.

4) Калинина Н.М. Хронический эндометрит. Подходы к диагностике и терапии. Consilium Medicum. 2015; 17 (6).

Источник